خالص سازی نانو بادی تولید شده بر علیه باکتری سودوموناس آئروژینوزا (Pseudomonas aeruginosa) با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یونی

نوع مقاله : مقاله آموزشی ، پژوهشی

نویسندگان

1 دانش آموخته کارشناسی ارشد دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد،دانشکده علوم،گروه زیست شناسی،مشهد،ایران

2 استادیار دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد،دانشکده علوم،گروه زیست شناسی،مشهد، ایران

3 دانشیار موسسه تحقیقات واکسن وسرم سازی رازی شعبه شمال شرق ، بخش تحقیق و توسعه فرآورده های بیولوژیک ، سازمان تحقیقات ، آموزش و ترویج کشاورزی ، مشهد

چکیده

شتر سانان دارای آنتی بادی ها می باشند که تنها شامل زنجیره ی سنگین بوده و به آن نانوبادی گفته می شود. از مزایای نانوبادی ها می توان به ، حلالیت بالا،مقاومت بیشتر در برابر شرایط نامناسب محیطی ،تمایل و اختصاصیت زیادبه آنتی ژن اشاره نمود . سودوموناس آئروژینوزا یکی ازمهمترین پاتوژن های فرصت طلب و سومین عامل عفونت های بیمارستانی بوده که مقاومت آنتی یوتیکی رو به افزایش دارد.
جهت خالص سازی نانوبادی تولید شده بر علیه سودوموناس آئروژینوزا  از کروماتوگرافی تعویض یونی  در دو بستر DEAE- سلولز و CM-Sephadex c50 همراه با چهار PH استفاده شد برای تعیین میزان خلوص از الکتروفورز پلی اکریل آمید سدیم دودسیل سولفات استفاده و میزان پروتئین با تکنیک برافورد مورد سنجش قرار گرفت . نتایج  نشان داد که استفاده ازکروماتوگرافی CM-Sephadex c50 جهت خالص سازی مناسب تر بوده و  نانوبادی تهیه شده با استفاده از  کیتوزان بعنوان ادجوانت در فراکسیون با غلظت کلرید سدیم  4/0مولار واجد تک باند 40 کیلودالتونی در PH های 5و6و7 می باشد. همچنین نانوبادی تهیه شده با استفاده از  آلژینات کلسیم بعنوان ادجوانت در فراکسیون با غلظت کلرید سدیم  5/0مولار تنها در PH6 تک باند 40 کیلو دالتونی دارد .
 

کلیدواژه‌ها