سعید زیبائی
دوره 13، شماره 47 ، شهریور 1404، ، صفحه 69-76
چکیده
لاکتوفرین یک گلیکوپروتئین متصل شونده به آهن بهعنوان آنتیاکسیدان عمل نموده و مانع واکنشهای رادیکال آزاد میشود. لاکتو پراکسیداز یک آنزیم اکسیدوردوکتاز یک پروتئین دفاعی است فعال شدن این آنزیم وترشح آن در غدد برون ریزی رخ می دهد .خالص سازی لاکتوفرین از شیر شتر،گاو،گوسفند وبز بر اساس روش راعی و همکاران با کروماتوگرافی تعویض ...
بیشتر
لاکتوفرین یک گلیکوپروتئین متصل شونده به آهن بهعنوان آنتیاکسیدان عمل نموده و مانع واکنشهای رادیکال آزاد میشود. لاکتو پراکسیداز یک آنزیم اکسیدوردوکتاز یک پروتئین دفاعی است فعال شدن این آنزیم وترشح آن در غدد برون ریزی رخ می دهد .خالص سازی لاکتوفرین از شیر شتر،گاو،گوسفند وبز بر اساس روش راعی و همکاران با کروماتوگرافی تعویض کاتیونی توسط رزینCM sephadex C-50 انجام گرفت.پس از تعیین غلظت پروتئین ها با آزمایش برادفورد و نانو دراپ، تأیید وجود لاکتوفرین و لاکتوپراکسیداز در فراکسیون های جمع آوری شده با آزمایش های الکتروفورز SDS-PAGE و تترامتیل بنزیدین.نتایج حاصل از تأیید وجود لاکتوفرین ولاکتوپراکسیداز با آزمایش تترامتیل بنزیدینن نشان داد که درفراکسیونها حاصل از شیرفراکسیون های 5/0، 6/0، 7/0، 8/0مولار NaCl، لاکتوفرین و فراکسیونهای 4/0، 9/0مولار لاکتوپراکسیداز ،در فراکسیونهای حاصل از شیر گاو فراکسیونهای 6/0، 7/0، 8/0مولار ، لاکتوفرین و فراکسیونهای 4/0، 5/0و9/0مولارلاکتوپراکسیداز، در فراکسیونهای حاصل از شیر گوسفند، فراکسیونهای 5/0، 6/0، 7/0، مولار ، لاکتوفرین و فراکسیونهای 4/0، 8/0و9/0مولارلاکتوپراکسیداز در فراکسیونهای حاصل از شیر بز، فراکسیونهای 5/0، 6/0، 7/0، 8/0مولار ، لاکتوفرین و فراکسیونهای 4/0، 9/0مولار لاکتوپراکسیداز می باشند.نتایج حاصل از اندازه گیری پروتئین در فراکسیون های شیرشتر نشان داد که فراکسیون7/0مولار NaCl در 595 نانومتر با مقدار88/586 میکروگرم بر میلی لیتر ، و فراکسیون 7/0 شیر گاوبا مقدار8/506 میکروگرم بر میلی لیتر و فراکسیون 6/0شیر گوسفند با مقدار48/596 میکروگرم بر میلی لیتر و فراکسیون 6/0شیر بز با مقدار 78/589 میکروگرم بر میلی لیتر پروتئین بیشترین مقدار را در بین فراکسیون ها داشتند .
شیوا سلیمانی؛ سعید زیبایی
دوره 11، شماره 44 ، آذر 1401، ، صفحه 7-16
چکیده
لاکتوفرین دارای وزن مولکولی حدود 80 کیلودالتون و یک گلیکوپروتئین گلوبولار است. لاکتوفرین پس از جداسازی از شیر شتر، با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یونی سی ام سفادکس سی 50 خالص گردید. با تزریق دو باکتری استافیلوکوکوس اورئوس و سودوموناس آئروژینوزا همراه با ادجوانتهای کیتوزان و آلوم به شتر، نانوبادی تهیه و با استفاده از آزمایش ...
بیشتر
لاکتوفرین دارای وزن مولکولی حدود 80 کیلودالتون و یک گلیکوپروتئین گلوبولار است. لاکتوفرین پس از جداسازی از شیر شتر، با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یونی سی ام سفادکس سی 50 خالص گردید. با تزریق دو باکتری استافیلوکوکوس اورئوس و سودوموناس آئروژینوزا همراه با ادجوانتهای کیتوزان و آلوم به شتر، نانوبادی تهیه و با استفاده از آزمایش الایزا تولید آنتیبادی اختصاصی مورد تایید قرار گرفت. لاکتوفرین و نانوبادی با استفاده از روش تیامین پیروفسفات بر روی کیتوزان بارگذاری شدند. اثر توامان لاکتوفرین و نانوبادی بارگذاری شده بر روی کیتوزان علیه باکتریها با استفاده از آزمایش بررسی میزان رشد باکترها در حضور نمونه یاد شده و یا عدم حضور (کنترل) بررسی گردید. جهت بررسی آماری ابتدا با استفاده از نرم افزار گراف پد پریسم 9 آزمون آنالیز واریانس یک طرفه انجام و در صورت وجود اختلاف معنیدار 0.05>P به منظور تفکیک گروهها از آزمون توکی استفاده شد. براساس نتایج، بسته به غلظت لاکتوفرین و رقت نانوبادی میزان رشد استافیلوکوکوس اورئوس و سودوموناس آئروژینوزا در مقایسه با گروه کنترل به ترتیب 5/77-57 درصد و 5/71-5/53 درصد کاهش یافت. با توجه به نتایج میتوان بیان داشت که لاکتوفرین و نانوبادی بارگذاری شده بر روی کیتوزان بر روی باکتریهای گرم مثبت موثرتر از باکتریهای گرم منفی می باشند. با توجه به نتایج میتوان بیان نمود که لاکتوفرین و نانوبادی بارگذاری شده بر روی کیتوزان به عنوان یک ماده ضدباکتریایی میتوانند در انواع برنامههای تجاری برای کنترل رشد و بقای عوامل بیماریزا مفید باشند.
سعید زیبایی؛ محدثه فرهنگ
دوره 11، شماره 42 ، خرداد 1401، ، صفحه 55-62
چکیده
لاکتوفرین کاربردهای بالینی و تجاری دارد.در مطالعه حاضر جهت خالص سازی لاکتوفرین از کروماتوگرافی تعویض یونی توسط CM sephadex C-50 استفاده و برای تایید ، از آزمایش SDS-PAGE و نیز عدم ایجاد رنگ در حضور تترامتیل بنزدین استفاده شد. بمنظور تولید آنتی بادی اختصاصی بر علیه لاکتوفرین شتر، خرگوش های سفید نر نیوزلندی با µg/ml120 لاکتوفرین و با استفاده ...
بیشتر
لاکتوفرین کاربردهای بالینی و تجاری دارد.در مطالعه حاضر جهت خالص سازی لاکتوفرین از کروماتوگرافی تعویض یونی توسط CM sephadex C-50 استفاده و برای تایید ، از آزمایش SDS-PAGE و نیز عدم ایجاد رنگ در حضور تترامتیل بنزدین استفاده شد. بمنظور تولید آنتی بادی اختصاصی بر علیه لاکتوفرین شتر، خرگوش های سفید نر نیوزلندی با µg/ml120 لاکتوفرین و با استفاده از ادجوانت های فروند و کیتوزان به مدت 6 هفته ایمن شدند. جهت تایید و مقایسه میزان آنتی بادی تولیدی از آزمایشهای دات بلات والایز استفاده گردید. درآزمایش دات بلات، ایجاد لکههای قهوهای تایید کننده اتصال آنتی ژن باآنتی بادی بوده که شدت ایجاد رنگ قهوهای با میزان آنتیبادی ارتباط دارد .نتایج الایزا نیز وجود غلظتهای بالایی از آنتی بادی را ثابت نمود. نتایج نشان داد که میزان تولید آنتی بادی اختصاصی با استفاده از ادجوانت کیتوزان نسبت به ادجوانت فروند بااختلاف معنی دار α<5% بیشتر می باشد.
حمید رضا فرزین؛ سعید زیبایی
دوره 10، شماره 39 ، شهریور 1400، ، صفحه 89-96
چکیده
آنفلوانزا مرغی ساب تایپ H9N2 شایع می باشد. تجزیه و تحلیل فیلوژنتیکی نشان می دهد که این ساب تایپ پتانسیل تبدیل شدن به ویروس بسیار بیماری زای H5N8 را داشته و خطری برای بروز سویه های نو ظهور مقاوم به داروهای ضد ویروسی محسوب می شود .لاکتوفرین قادر است برخی از عفونت های ویروسی را کنترل نماید.در مطالعه حاضر, اثر لاکتوفرین استخراج شده از شیر شتر ...
بیشتر
آنفلوانزا مرغی ساب تایپ H9N2 شایع می باشد. تجزیه و تحلیل فیلوژنتیکی نشان می دهد که این ساب تایپ پتانسیل تبدیل شدن به ویروس بسیار بیماری زای H5N8 را داشته و خطری برای بروز سویه های نو ظهور مقاوم به داروهای ضد ویروسی محسوب می شود .لاکتوفرین قادر است برخی از عفونت های ویروسی را کنترل نماید.در مطالعه حاضر, اثر لاکتوفرین استخراج شده از شیر شتر برای ممانعت از آپوپتوز و نکروز القاء شده بوسیله ویروس آنفلوآنزا سویه H9N2 مورد بررسی قرار گرفت.جهت جدا سازی لاکتوفرین از کروماتوگرافی تعویض یونی بوسیله 50 CM Sephadex C-استفاده گردید.پس از بررسی اثر سمیت سلولی لاکتوفرین خالص شده و تیتر ویروس جهت بررسی جود آپاپتوز و نکروز القاء شده توسط ویروس در کشت سلولی ، از رنگ آمیزی آکریدین اورنج-اتیدیوم بروماید و مشاهده با میکروسکوپ فلئورسانس استفاده شد. نتایج نشان داد که لاکتوفرین مانع از آپوپتوز القاء شده توسط ویروس آنفلوآنزا H9N2در کشت سلول می شود و قادر نیست مانع از نکروز القاء شده گردد.
معصومه راعی؛ سعید زیبائی؛ قدیر رجبزاده
دوره 6، شماره 24 ، آذر 1396، ، صفحه 51-56
چکیده
در این پژوهش امکان ریزپوشانی لاکتوفرین با استفاده از آلژیناتکلسیم مورد بررسی قرار گرفت. لاکتوفرین مورد استفاده در این بررسی با روش کروماتوگرافی تعویض یونی از شیر شتر استخراج و خالصسازی شد. ریزپوشانی لاکتوفرین با دو غلظت 1 و 5/0 درصد وزنی/حجمی از آلژینات کلسیم انجام شد. نتایج نشان داد که روش مورد استفاده برای ریزپوشانی مناسب ...
بیشتر
در این پژوهش امکان ریزپوشانی لاکتوفرین با استفاده از آلژیناتکلسیم مورد بررسی قرار گرفت. لاکتوفرین مورد استفاده در این بررسی با روش کروماتوگرافی تعویض یونی از شیر شتر استخراج و خالصسازی شد. ریزپوشانی لاکتوفرین با دو غلظت 1 و 5/0 درصد وزنی/حجمی از آلژینات کلسیم انجام شد. نتایج نشان داد که روش مورد استفاده برای ریزپوشانی مناسب است. بررسی اندازه و شکلشناسی ذرات با میکروسکوپ الکترونی رویشی (SEM)، تشکیل نانوکپسولها را تایید نمود.
